产品原理
土壤样品存在大量的抑制因子如腐殖酸、金属离子等,而纯化的DNA中只要有这些微量物质的存在,都会影响到PCR等酶促反应。GBS公司的土壤DNA试剂盒(Soil DNA Kit)采用独特的腐殖酸除去液能够有效去除腐殖酸等,结合GBS吸附柱能够,能有效去除金属等抑制因子。一次实验可同时处理一个或多个0.1-0.5g 左右的土壤样品,纯化的DNA可直接用于PCR反应,酶切或定量实验。土壤样品经玻璃珠研磨、裂解液裂解后,腐殖酸、蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除;调节结合条件然后转移至GBS吸附柱子中离心吸附DNA;两次快速洗涤去除残留的多糖类等杂质,最后DNA溶解于灭菌水或低盐缓冲液中。
实验结果 
腐殖酸吸附剂(Buffer C2)使用效果比较 在土壤样品裂解时,比较加与不加Buffer C2的所获得的裂解液澄清度。从上图看,加有Buffer C2的样品,颜色明显浅很多,说明Buffer C2对出去腐殖酸、色素等效果明显。 1,2:裂解时加入Buffer C2 3,4: 裂解时未加Buffer C2 
裂解液加Buffer C4进一步沉淀除杂效果 上一步获得的裂解液上清加入Buffer C4进一步处理,沉淀离心除杂,裂解时加有Buffer C2(腐殖酸吸附剂)的,再经Buffer C4处理几乎不再有颜色,而不加Buffer C2的颜色还很深。 1,2:裂解时加有Buffer C2 3,4:裂解时不加Buffer C2 
1, 2: SDS高盐酚氯仿抽提法 3, 4: 使用Soil DNA Kit提取 1, 3: 为花基土壤 2, 4: 河边淤泥 可适用的分子生物学实验 PCR、限制性酶切、Southern杂交等。
|

|